仪器简介：

AKTA purifier是一个快速分离肽、核酸、蛋白质和天然产物的全新液相色谱系统，还可用于一些复杂物质的常规检测，如抗生素高分子杂质分析，和传统HPLC不一样的是， AKTA purifier兼具了分析和制备能力，可以准确收集图谱上每一个峰作其它研究用途。

仪器用途：

适用各种层析技术，专门分离和纯化各类生物分子，包括天然蛋白质，重组和融合蛋白质、肽、寡核酸、质粒、病毒、抗生素、生物碱等等，操作肽图等精确分析和小量制备应用

仪器特点：

高度兼容、简单快捷、全自动操作、人工智能。

1. 泵：2个系统泵， 流量范围：0.01-100ml/min
2. 压力范围：0-10MPa
3. 波长范围：254um-280um
4. 电导检测：1-999.9us/cm
5. 样品收集：自动收集器
6. 压力感应器：在线检测系统压力，保证系统、层析柱及工艺的安全性 

仪器信息：

仪器型号：ÄKTA™purifier-100

生产产家：GE

仪器价格：52.17万元

购置日期：2010.7

AKTA 层析纯化系统操作规程

1. 开机：打开仪器的主电源，启动电脑。双击UNICORN图标，进入操作界面。

2.准备工作溶液和样品：须经过0.45µm滤膜过滤，也可高速离心后取上清备用。

3. 清洗及管道准备：先将A1及B1管道放入合适的溶液中，点system control → manual→Pump→Pump Wash Explorer，确认A1入口的阀门位置，B1管道为ON，execute。泵清洗将自动结束。

4. 安装层析柱：manual→pump→flow rate，输入相应流速，insert；选择Alarm&mon→alarm pressure→ high alarm，insert（输入填料的耐受压力），根据不同的层析柱选择不同的接头。

5. 纯化

选择检测波长280nm，等待柱子平衡好（观察UV，电导线平直），将紫外调零，选择Alarm&Mon→autozero，exectue。

用样品环上样：将样品吸进注射器，推掉气泡，从injection Valve的3号位推入，推好后不要取下注射器。点manual→flow path→injection Valve→inject，execute。

洗脱(IEX,HIC,AF,RC)：上样后用缓冲液尽量将穿透峰洗回基线。点manual →pump→gradient，按照自己的工艺选择targetB（100％）和length。

设定收集： 

• 固定体积收集：(如果有)出口阀manual→flowpath→Outlet →F2；选择Frac→Man_fractionation，选择收集Rack型号、收集顺序以及tube类型，输入每管收集体积，exectue。结束固定体积收集选择Frac→fractionation_stop，exectue。

• 峰收集：选择Frac→Peak_fracParametersUV_Level,设定峰收集的参数，选择Frac→Peak_Man_fractionation设定峰收集每管收集的体积，exectue。结束峰收集选择Frac→Peak_frac_stop，exectue。

6. 清洗泵及卸下层析柱：将A1和B1入口放入纯水中，启动pump wash purifier功能冲洗A泵和B泵及整个管路。再将A1和B1入口放入20％乙醇中，同样操作将乙醇冲满整个管路保存。设置系统保护压力，然后先拆柱子的下端，正在滴水的时候将堵头拧上，再拆柱子的上端，最后拧上上端的堵头。整个过程防止气泡进入。

7. 关闭电源：从软件系统的第一个窗口unicorn manager点击退出，其他窗口不能单独关闭。然后关闭AKTA主机电源，关闭电脑电源。

注意事项：

未经培训一律不得上机操作，如需使用请联系平台工作人员。